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免疫組化檢測(cè)服務(wù)內(nèi)容與實(shí)驗(yàn)周期
服務(wù)內(nèi)容 | 實(shí)驗(yàn)周期(日) |
石蠟包埋 | 5-7日 |
石蠟切片 | 5-7日 |
染色(自帶一抗) | 1-2周(視片數(shù)而定) |
染色(我公司提供一抗) | 1-2周(視片數(shù)而定) |
TUNEL(自帶試劑盒) | 1-2周(視片數(shù)而定) |
TUNEL(我公司全包) | 1-2周(視片數(shù)而定) |
組織脫鈣 | 20-30日 |
HE染色 | 1-2周(視片數(shù)而定) |
冰凍切片 | 1-2周(視片數(shù)而定) |
免疫組化操作步驟
⑴、石蠟切片脫蠟至水。
⑵、 3%H 2 O 2 室溫孵育 5-10 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。
⑶、蒸餾水沖洗, PBS 浸泡 5 分鐘 x2 (如需抗原修復(fù),可在此步后進(jìn)行)。
⑷、 5-10% 正常山羊血清(PBS 稀釋)封閉,室溫孵育 10 分鐘,傾去血清,勿洗。滴加 一抗 工作液, 37 ℃ 孵育 1-2 小時(shí)或 4 ℃ 過(guò)一晚。
⑸、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。
⑹、滴加適量 生物素標(biāo)記二抗工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。
⑺、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。
⑻、滴加適量的 辣根酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。
⑼、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。
⑽、顯色劑顯色 3-15 分鐘(DAB 或 NBT/BCIP)
⑾、自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明,封片。
免疫組化染色步驟
冰凍切片 4-8um ,室溫放置 30 分鐘后,入 4 ℃丙酮固定 10分鐘,PBS洗,5分鐘x3,用過(guò)氧化氫孵育5-10分鐘,消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。
免疫組化判定分析
免疫組化染色(IHC)
從實(shí)驗(yàn)結(jié)果而言,免疫組化技術(shù)服務(wù)主要涉及抗體實(shí)驗(yàn)結(jié)果的描述與分析,圖片的確定與選取,相關(guān)數(shù)據(jù)的提供,上述工作是免疫組化工作的重點(diǎn)內(nèi)容,只有嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)操作,專業(yè)化的結(jié)果分析才能更好的滿足客戶的要求,這點(diǎn)對(duì)于形式為腹水,上清,培養(yǎng)液之類的抗體顯得更為重要。關(guān)于上述服務(wù)內(nèi)容應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)開始前由雙方明確,一般而言,客戶方實(shí)驗(yàn)前應(yīng)提出需要什么樣的結(jié)果與分析,例如是簡(jiǎn)要還是詳細(xì)的描述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,需要實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)否,圖片的數(shù)量與規(guī)格等。如果為雙盲試驗(yàn)或有第三方參與,則事先申明。
免疫組化檢測(cè)服務(wù)
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