1、抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并堅持其免疫學活性;
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構成酶結合物,而此種酶結合物仍能堅持其免疫學和酶學活性;
3、酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可依據參加底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在,并且色彩反響的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,ELISA檢測試劑盒可依據已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺制作規范曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
4、試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠丙氨酸氨基轉移酶(ALT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。
5、用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠丙氨酸氨基轉移酶(ALT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
二:ELISA檢測試劑盒的注意事項:
1、嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
小編總結:檢測試劑盒有必要恪守以下中心原理,看完本文您就應該有了基本的認識和了解相信大家都明白了吧!總的來說,希望對大家有所幫助。